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胃上皮细胞培养

上皮细胞培养


一、胃上皮细胞培养操作步骤:

1.取材:取胃溃疡或胃癌手术切除胃标本远端非病变区粘膜少许。

2.清洗:用含庆大霉素(400 微克/毫升)和二性霉素(2 微克/毫升的Hanks)液漂洗后,用钝器剥离下粘膜,剪成1mm3 大小。

3.消化:在I 型胶原酶和透明质酸酶中,于37℃中消化80 分钟。

4.离心:收集细胞悬液,800 转/分离心后,Hanks 液漂洗两次。

5.接种:末次离心后加入含有1%~2%胎牛血清的完全培养基,接种入不同孔数的培养板中,接种量依不同实验目的而定。


二、胃上皮细胞培养注意事项:

   细胞原代培养一定要保持工作区的无菌清洁,先用紫外灯**1h,操作前用75%乙醇**,穿上实验服,戴上口罩和帽子,操作时不能大声说话,双手戴上一次性橡胶手套,整个无菌操作都应该在酒精灯的周围进行。


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