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ELISA的原理及基本类型

1971年Engvall和Perlmann发表了酶联**吸附测定(enzymelinkedimmunosorbentassay, ELISA)用于IgG定量测定的文章,使得1966年用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。

ELISA实验原理

ELISA实验基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其**学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其**学活性,又保留酶的活性。

进行检测时,样品中的受检物质(抗原或抗体)与固定的抗体或抗原结合。通过洗板除去非结合物,再加入酶标记的抗原或抗体,此时,能固定下来的酶量与样品中被检物质的量相关。通过加入与酶反应的底物后显色,根据颜色的深浅可以判断样品中物质的含量,进行定性或定量的分析。

由于酶的催化效率很高,间接地放大了**反应的结果,使测定方法达到很高的灵敏度。

ELISA实验基本类型

ELISA实验可用于测定抗原,也可用于测定抗体。这种测定方法中有3种必要的试剂:

1.固相的抗原或抗体;

2.酶标记的抗原或抗体;

3.酶作用的底物。

根据试剂的来源和标本的性状及检测的具备条件,可设计出各种不同类型的检测方法。

1.双抗体夹心法测抗原

2.竞争法测抗原

3.**抑制法测抗原

4.间接法测抗体


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